Широкое внедрение методики ICSI в клиническую эмбриологию в начале 90-х годов позволило проводить оплодотворение сперматозоидами пациентов с олигозооспермией (немногочисленные сперматозоиды в эякуляте), а также сперматозоидами, полученными хирургическим путем у пациентов с азооспермией (сперматозоидов в эякуляте нет). При этом количество пригодных для оплодотворения подвижных нормальных сперматозоидов может оказаться крайне малым, а их выделение очень трудоемкое и требует больших усилий и затрат времени. Если существует высокий риск повторного неполучения этого уникального генетического материала или физическая невозможность его получения в последующих попытках, требуется сохранение выделенных единичных сперматозоидов путем криоконсервации.
И вот здесь возникает довольно серьезная проблема, которая состоит в том, что в ходе манипуляций уникальные единичные сперматозоиды могут быть утрачены даже в очень небольших, микроскопических объемах. Решить эту проблему могут микроконтейнеры.
Они физически локализуют объект в большем объеме, и тем самым значительно упрощают и облегчают манипуляции, связанные с обработкой криоконсервантами, размораживанием и поиском сперматозоидов при оплодотворении путем ICSI. Для пациента такая криоконсервация может быть страховкой от неполучения сперматозоидов непосредственно в день пункции или избавлением от повторной травматичной операции. Иными словами, микроконтейнеры облегчают жизнь и эмбриологу, и пациенту.
В 1996 г. американский исследователь Жак Коен из Института репродуктивной медицины и науки Медицинского центра св.Варнавы в Ливингстоне (IRMS), предложил методику криоконсервации единичных сперматозоидов в пустых оболочках ооцитов человека и лабораторных животных (рис.1). Эти неклеточные оболочки из гелеподобного вещества носят название zona pellucida (ед.число). Они окружают каждую яйцеклетку, и ранние зародыши развиваются в этих оболочках до вылупления из них на стадии бластоцисты, непосредственно перед имплантацией. Zonae pellucidae (мн.число) являются очень хорошими микроконтейнерами, потому что помещать в них сперматозоиды можно точно так же, как в цитоплазму яйцеклетки при ICSI, а криоконсервация в таких контейнерах похожа на криоконсервацию эмбрионов. И все же, несмотря на успешное использование этой методики в клинике IRMS, она по-прежнему остается экспериментальной и не используется широко. Этому препятствуют многие обстоятельства, два из которых наиболее существенны. Во-первых, подготовка такого микроконтейнера довольно сложна, необходимо извлечь из оболочки клеточное содержимое, и каждый контейнер подготавливается индивидуально. Во-вторых, такие микроконтейнеры животного происхождения могут быть инфицированы вирусами и не исключают контакта сперматозоидов с биологически активными веществами и чужеродным генетическим материалом.
Чтобы избежать этих проблем, мы разработали и изготовили искусственные микроконтейнеры, напоминающие zonae pellucidae (рис.2). Для их изготовления мы используем только два вещества – деионизованную стерильную воду и агарозу. Агароза сходна по своей природе и свойствам с веществами оболочек яйцеклеток, но она биологически инертна и безопасна для сперматозоидов. Изготовление микроконтейнеров происходит в стерильных условиях и исключает возможность заражения. Сам процесс замораживания сперматозоидов в микроконтейнерах не отличается принципиально от обычной криоконсервации в жидком азоте, а выживаемость сперматозоидов ничуть не ниже. Эта новая методика позволяет нам проводить криоконсервацию в тех случаях, когда приходится иметь дело лишь с единичными сперматозоидами во всем объеме спермы. Мы надеемся, что в будущем сможем эффективно использовать этот способ хранения уникального генетического материала в нашей работе.
|
|
|
|
Рис.1 |
Рис.2 |
Исаев Д.А., Залетов С.Ю.
Статья получена: www.ma-ma.ru
Противовирусные препараты: за и против
Добро пожаловать в Армению. Знакомство с Арменией
Крыша из сэндвич панелей для индивидуального строительства
Возможно ли отменить договор купли-продажи квартиры, если он был уже подписан
Как выбрать блеск для губ
Чего боятся мужчины
Как побороть страх перед неизвестностью
Газон на участке своими руками
Как правильно стирать шторы
Как просто бросить курить
- 2655 -
